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產品分類祝賀湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫院訂購我司產品發表文章成功
標題《絞股藍提取物通過調控lncRNA PICSAR對IL-1β誘導軟骨細胞損傷的保護作用及機制研究》
摘要:目的探討絞股藍提取物對白介素1β(IL-1β)誘導軟骨細胞損傷的作用及分子機制。方法 2020年10月—2021年4月于湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫院進行實驗,將關節軟骨細胞隨機分為對照(NC)組、IL-1β組及絞股藍提取物低、中、高劑量組、IL-1β+si-con組、IL-1β+si-lncRNA PICSAR組、pcDNA-con+高劑量組、pcDNA-lncRNA PICSAR+高劑量組,分別對其進行干預水平;用細胞計數試劑盒8(CCK-8)檢測細胞活力,流式細胞儀檢測細胞凋亡情況,蛋白質印跡(Western-blot)法檢測裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleave-caspase-3)蛋白表達水平;酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性;實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測lncRNA PICSAR表達水平。
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細胞凋亡也可以用流式細胞儀觀察細胞光散射的變化來檢測。細胞發生凋亡時,由于胞漿和染色質濃縮、核碎裂,產生凋亡小體。凋亡前期,染色質皺縮,細胞密度增加;凋亡后期,細胞產生凋亡小體,細胞的光散射均會發生變化。
細胞周期與凋亡檢測試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)采用了經典的碘化丙啶染色(Propidium staining)方法對細胞周期與凋亡進行檢測分析。利用碘化丙啶能夠嵌入雙鏈DNA中,并使其產生熒光,并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比的特性;結合細胞不同周期中,DNA含量的規則變化,可以區分細胞處于的周期和狀態。本試劑盒可用于組織細胞、貼壁或懸浮細胞的細胞周期與凋亡檢測(如用于組織的細胞周期與凋亡檢測,則須把組織消化成單細胞狀態,才可進行檢測)。