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標題《lncRNA LUCAT1對膀胱癌細胞增殖、凋亡的影響及其機制研究》

摘要：目的探討lncRNA LUCAT1對膀胱癌細胞的增殖和凋亡的影響以及潛在的作用機制。方法培養正常膀胱上皮細胞SV-HUC-1和膀胱癌細胞J82、5637、BIU-87,將膀胱癌細胞5637隨機分為control組、si-NC組,si-LUCAT1組、pcDNA-NC組、pcDNA-LUCAT1組、si-LUCAT1+anti-miR-NC組、si-LUCAT1+anti-miR-493-5p組。qRT-PCR法檢測miR-493-5p和LUCAT1表達水平;Western Blot檢測蛋白表達;MTT法檢測細胞活性;流式細胞術檢測細胞凋亡;雙熒光素酶報告實驗驗證LUCAT1和miR-493-5p的靶向關系。結果與膀胱上皮細胞SV-HUC-1相比,膀胱癌細胞J82、5637、BIU-87中LUCAT1的表達水平明顯升高,miR-493-5p表達水平明顯降低,差異均有統計學意義（P<0.05）;與si-NC組相比,si-LUCAT1組細胞活性降低,凋亡率升高,CyclinD1

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  細胞凋亡是細胞的基本特征之一，在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V 是一種分子量為35.8 KD 的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）高親和力特異結合。FITC-Annexin V 結合到凋亡細胞后，在藍色光的激發下，發出綠色熒光，區分出凋亡細胞與正常細胞。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）是一種核酸染料，它不能穿透完整細胞膜，但對凋亡晚期細胞和死細胞的破損細胞膜能夠穿透，并使細胞核紅染。將FITC-Annexin V 與PI 匹配使用，可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞區分開來。